微生物检验包括病原体分离、鉴定,产品卫生指标检测,医疗用品和器械无菌试验,消毒产品杀灭效果试验,微生物的生化特性研究,分子生物学研究和疫苗研究等。对于工作环境均有一定的要求。目前尚未见到更多的资料报道微生物检验洁净实验室的布局、技术要求。我们根据病原体分离、卫生指标检测、无菌试验、杀灭效果试验等工作性质和工作环境要求,设计、研究和建造微生物洁净实验,现将结果报告如下。

材料与方法

1、设计要求

     微生物检验洁净度　洁净室工作台面为100级;室内环境为1000级;缓冲间为10000级;更衣和换鞋间为100000级。

   　新风进入量和换气次数　新风进入量≥20%;洁净室换气次数≥50次;缓冲间≥25次;更衣、换鞋间≥15次。病原体分离和消毒产品杀灭试验洁净实验室回风过滤后排放室外。

洁净实验室布局

     卫生防疫系统的微生物检测应设无菌试验洁净室一间;卫生指标检测洁净室一间;病原体分离、鉴定、消毒产品杀灭效果试验洁净室二间,微生物检验洁净室实验室布局。

洁净室

1、2静压差为正压,洁净室

3、4静压差为相对负压。

      根据无菌产品检测时对外包装必须经过清洁处理的要求:设计1m²的传递窗,择品在传递窗内由上端送入的10000级净空气吹去尘埃处理。

     保证洁净室内的气温达到18～25℃的要求;冷和热的空气必须经过净化后送入,确保气流上送下回的要求。

     人流和物流应分开,工作人员换鞋后v更衣v风淋v缓冲室v洁净实验室内。物品从传递窗上部送入,工作完毕后的废物从传递窗下部取出。

     安全装置包括建造安全通道及各洁净室均有警报装置。

2、检测方法

　 仪器　

1、BCJ—1型尘埃粒子计数器。

2、YJB21500补偿微压计(上海气象仪器厂)

3、EMB数字风速仪(上海天宇科技应用研究所)

4、HS6280D声级仪(国营四三八○二厂嘉兴分厂)

  方法　

按“JGJ71290洁净室施工及验收规范”和GB50243—97通风与空调工程施工及验收规范”要求:静压差、洁净度、沉降菌、室内温度、相对湿度、噪音、各送风口风速、新风量、总送风量和换气次数检测。

结　　果

洁净度

洁净室(1～4号)内≥015μm尘埃检测结果表明:工作台面(层流罩下面)均<315个/L,达到100级洁净度,室内环境为<35个/L,达到1000级洁净度,。缓冲室Ⅰ≥015μm尘埃为202个/L,缓冲室Ⅱ为154个/L,均小于350个/L的10000级洁净标准。

2、静压差　

洁净室Ⅰ对缓冲室Ⅱ为18103pa,洁净室Ⅱ对安全通道为25168pa,洁净室Ⅲ和Ⅳ对缓冲室Ⅰ为-2135pa,换鞋和更衣对洁净室处为5pa。

3、室内沉降菌　洁净室1～4号的工作台面按14只/m2检测沉降菌,平均为0115～c0125cfu/皿30min之间。室内环境平均为1～2cfu/皿30min之间;缓冲间平均为7cfu/皿30min,更衣间平均为21cfu/皿30min。

4、噪音、温度　洁净室内噪音均在55dB以下。当调节温度开机后,洁净室Ⅰ和Ⅱ均在30min内达到调节温度,洁净室Ⅲ和Ⅳ及缓冲间、更衣室均在45min内达到调节温度。

讨　　论

传统的微生物检测实验室采取建造缓冲间,使实验室与外界隔离,在进行实验操作时不受外界气流的影响,使实验检测不污染。但由于室内空气不流通,室内空气混浊,夏季工作室内气温高,冬季室内气温低,不但对微生物工作者的身体影响较大,而且还影响实验检测。近年来,室内空调的使用,造成微生物实验室内气流混乱,直接影响检测结果。因此,根据卫生防疫系统的业务工作要求,设计能适应无菌检测,杀灭效果试验,卫生指标检测,病原体分离鉴定,流行病分子生物研究的微生物检测洁净实验室是必然趋势,它不同于其他工业洁净室,开展不同内容的微生物检测工作,均有特殊的要求。我们设计的微生物洁净实验室,具备以下几方面的要求。

1、洁净室采用上送下回的气流方式,层流罩送入100级洁净风,环境送入1000级洁净风,要求在层流罩隔离屏去掉情况下,工作台面的100级洁净度不受影响。室内顶部四周不形成气流死角。

2、进行病原体分离、鉴定、杀灭效果试验,血清学试验,分子生物学研究等工作的实验室,由于使用已知和未知的微生物(细菌菌株、真菌菌株和病毒毒种等),当微粒污染工作台面等地方或在操作过程中,经气流冲击将成为≤015μm的微粒,在空气中形成气溶胶状态,容易造成实验室感染,在设计过程中要求该实验室的气压与一缓成相对负压,回风经过过滤后,由风机排放室外,不再重复使用,成为全新风的实验室。

3、微生物检测洁净室一般面积都不大,在未采用中央空调调节气温的情况下,只能用柜式空调控制室内气温,但不能将柜机直接安装在洁净实验室内,因柜机吹出的风会改变洁净的气流流向,破坏洁净度。本次研究、设计、建造的微生物检测洁净室只有60m²,其中2m²为机房,柜机安装在机房内,新风和回风混合后,由柜机将混合空气制冷或制热后,通过风管送入总风机,再由总风机输送到各洁净室,室内空气在45～30min均达到控制温度的要求,同时不破坏气流的流向。

4、微生物检测洁净实验室总换气次数达50次以上,4只洁净室按每只4名工作人员计算,每人每小时新鲜空气达到大于40m3的要求。但有缓冲间Ⅰ和更衣换鞋间的换气次数未达到25次和15次。主要原因是二间洁净室的回风利用缓冲间Ⅰ和更衣换鞋室送回机房。

5、为了使送入洁净室内的物品减轻对洁净室的污染,物品必须通过传递窗送入,同时,进行无菌试验的物品在进行检测时,必须进行外包装清洁、除菌。设1m2的传递窗,并有1000级洁净空气通入,均能达到上述的要求。目前,各单位为了适应工作范围的要求,改造微生物检测的洁净环境,提高微生物检测水平,因此,在设计微生物检测洁净实验的过程中,应考虑到检测工作的特殊要求。